Produtos

A diferenciación de fibroblastos orbitais en adipocitos maduros e a posterior acumulación de tecido adiposo mostrouse na progresión da orbitopatía de Graves (GO).A autofaxia está implicada na adipoxénese, pero pouco se sabe sobre o papel da autofaxia no inicio e progresión da GO.O obxectivo deste estudo é investigar o papel da autofaxia na patoxénese de GO. Analizáronse explantes de tecido adiposo/conxuntivo orbital de pacientes con GO e de suxeitos normais, así como fibroblastos orbitais illados.A adipoxénese foi inducida usando medio diferenciador con ou sen peróxido de hidróxeno, e a autofaxia manipulouse usando bafilomicina A1 e ARN de horquilla curta (shRNA) dirixido a Atg5.Os autofagosomas foron identificados por microscopía electrónica.Analizáronse a expresión de xenes relacionados coa autofaxia e os factores de transcrición relacionados coa adipoxénese mediante a reacción en cadea da polimerase de transcrición inversa en tempo real e/ou a análise Western blot.A acumulación de gotas de lípidos examinouse mediante tinción de Oil Red O. As vacuolas autofáxicas foron máis abundantes nas células GO que nas non GO (p<0,05).A expresión de xenes relacionados coa autofaxia foi significativamente maior nos tecidos e células GO que nos seus homólogos non GO, respectivamente.A interleucina-1β aumentou a proteína LC3-II, p62 e Atg7 nas células GO.A acumulación de autofagosomas mostrouse no día 4 da adipoxénese e diminuíu no día 10, xunto coa formación de gotas de lípidos.A expresión das proteínas LC3 e p62 aumentou nas 48 horas posteriores á diferenciación e diminuíu gradualmente desde o día 4 ata o día 10. O tratamento con bafilomicina A1 e a eliminación de Atg5 polo shRNA inhibiron a acumulación de gotas de lípidos e suprimiron a expresión dos marcadores adipoxénicos. A autofaxia aumentou no tecido e nas células GO tecidos e células non GO, o que suxire que a autofaxia xoga un papel na patoxénese de GO.A manipulación da autofagia pode ser un obxectivo terapéutico para o GO.