Produtos

As vías moleculares patóxenas en enfermidades hepáticas cirróticas como o virus da hepatite C (VHC), a hepatite autoinmune (AIH) e a cirrose biliar primaria (CBP) están pouco caracterizadas.Os xenes expresados ​​de forma diferenciada adoitan ser importantes na patoxénese da enfermidade.A hibridación sustractiva de supresión (SSH) é un enfoque de todo o xenoma que enriquece as transcricións de ARNm expresadas de forma diferencial.Pretendemos facer novas observacións da expresión diferencial de xenes na cirrose usando SSH combinado coa reacción en cadea da polimerase da transcriptase inversa cuantitativa en tempo real (RT-PCR).Os transcriptomas hepáticos na cirrose do VHC, a cirrose AIH, a PBC e o tecido hepático non enfermo foron examinados por SSH.Os clons de ADN complementario (ADNc) resultantes foron cribados de novo para a expresión diferencial mediante hibridación dot-blot e despois secuenciados.A expresión xénica seleccionada cuantificouse mediante RT-PCR en tempo real.Despois de SSH, 694 clons foron examinados de novo para a expresión xenética diferencial, dos cales 145 foron secuenciados e descubriuse que derivaban de 89 xenes diferentes.Sete clons eran homólogos só con secuencias de etiquetas de secuencia expresada (EST) que codificaban xenes sen función coñecida.A expresión regulada ao alza de catro xenes foi confirmada por RT-PCR en tempo real: membro 3 da superfamilia transmembrana 4 (tetraspanina CO-029) en todas as formas de cirrose, proteína de interacción hedgehog (HIP) na cirrose AIH e quitinase 3-like-1. (HC gp-39 ou ykl-40) e repetición de ácido arginina-glutámico (RERE) na cirrose do VHC.Observáronse polimorfismos do xene RERE e variantes de empalme en todos os tecidos examinados.A regulación positiva da tetraspanina CO-029 localizouse principalmente nas células biliares.En conclusión, realizáronse novas observacións da expresión diferencial dos xenes na cirrose humana usando SSH como ferramenta de descubrimento principal.En particular, están xustificados máis estudos sobre o xene RERE e os seus produtos na enfermidade hepática asociada ao VHC.