Produtos

X-gal (tamén abreviado BCIG para 5-bromo-4-cloro-3-indolil-β-D-galactopiranósido) é un composto orgánico que consiste en galactosa unida a un indol substituído.O composto foi sintetizado por Jerome Horwitz e colaboradores en 1964. O nome químico formal adoita abreviarse a frases menos precisas pero tamén menos engorrosas como bromocloroindoxyl galactoside.O X do indoxilo pode ser a fonte do X na contracción X-gal.X-gal utilízase a miúdo en bioloxía molecular para probar a presenza dun encima, a β-galactosidase, no lugar da súa diana habitual, un β-galactosido.Tamén se usa para detectar a actividade deste encima en histoquímica e bacterioloxía.X-gal é un dos moitos glicósidos e ésteres de indoxilo que producen compostos azuis insolubles similares ao colorante índigo como resultado da hidrólise catalizada por encimas.

X-gal é un análogo da lactosa e, polo tanto, pode ser hidrolizado polo encima β-galactosidasa que escinde o enlace β-glicosídico da D-lactosa.X-gal, cando se escinde pola β-galactosidase, produce galactosa e 5-bromo-4-cloro-3-hidroxiindol - 1. Este último dimerízase espontáneamente e óxido en 5,5'-dibromo-4,4'-dicloro -índigo - 2, un produto intensamente azul que é insoluble.O X-gal en si é incoloro, polo que a presenza de produtos de cor azul pode usarse como proba para a presenza de β-galactosidase activa.Isto tamén permite que a β-galactosidase bacteriana (a chamada lacZ) se utilice como reporteiro en varias aplicacións.

Na análise de dous híbridos, a β-galactosidase pode usarse como indicador para identificar proteínas que interactúan entre si.Neste método, as bibliotecas de xenomas poden ser analizadas para a interacción proteica mediante levadura ou sistema bacteriano.Cando hai unha interacción exitosa entre as proteínas que se están a analizar, producirase a unión dun dominio de activación a un promotor.Se o promotor está ligado a un xene lacZ, a produción de β-galactosidase, que resulta na formación de colonias pigmentadas de azul en presenza de X-gal, indicará, polo tanto, unha interacción exitosa entre as proteínas.Esta técnica pode limitarse á selección de bibliotecas de tamaño inferior ao 106. A escisión exitosa de X-gal tamén crea un cheiro notablemente desagradable debido á volatilización do indol.

Como o X-gal en si é incoloro, a presenza de produto de cor azul pódese usar como proba para a presenza dunha β-galactosidase activa.

Esta fácil identificación dun encima activo permite que o xene da βgalactosidase (o xene lacZ) se utilice como xene indicador en varias aplicacións.