Produtos

A acumulación nuclear dunha forma mutante da proteína nuclear Lamin-A, chamada Progerin (PG) ou Lamin AΔ50, prodúcese na Síndrome de Hutchinson-Gilford Progeria (HGPS) ou Progeria, unha enfermidade de envellecemento acelerado.Un dos principais síntomas deste trastorno xenético é a perda de graxa subcutánea debido a unha dramática lipodistrofia. Inducimos de forma estable a expresión de PG e GFP humanas -Green Fluorescent Protein- como control en células 3T3L1 utilizando un sistema lentiviral para estudar o efecto da expresión de PG na capacidade de diferenciación desta liña celular, un dos modelos adipoxénicos máis utilizados.Realizouse a proteómica cuantitativa (iTRAQ) para estudar o efecto da acumulación de PG.Varias das proteínas moduladas validáronse mediante inmunotransferencia e PCR en tempo real.A función mitocondrial analizouse mediante a medición de a) a actividade basal mitocondrial, b) a produción de anión superóxido e c) a eficiencia individual dos diferentes complexos da cadea respiratoria. diminución da taxa de proliferación e defectos na capacidade adipoxénica en comparación co control.A análise proteómica cuantitativa mostrou 181 proteínas significativamente (p<0,05) moduladas en preadipocitos que expresan PG.A función mitocondrial está deteriorada nas células que expresan PG.En concreto, detectamos un aumento da actividade do complexo I e unha sobreprodución de anión superóxido.A incubación con axentes eliminadores de especies reactivas de oxíxeno (ROS) conduce a unha diminución da proteólise autofáxica como revela a relación LC3-II/LC3-I. A expresión de PG nas células 3T3L1 promove cambios en varios procesos biolóxicos, incluíndo a estrutura do citoesqueleto, o metabolismo dos lípidos, o calcio. regulación, tradución, pregamento de proteínas e xeración de enerxía polas mitocondrias.Os nosos datos reforzan a contribución da acumulación de ROS ao fenotipo de envellecemento prematuro e establecen un vínculo entre a disfunción mitocondrial e a perda de proteóstase en HGPS.