Produtos

A beta-D-2'-desoxi-2'-fluoro-2'-C-metilcitidina (PSI-6130) é un potente inhibidor específico da síntese de ARN do virus da hepatite C (VHC) nas células do replicón Huh-7.Para inhibir a ARN polimerase NS5B do VHC, a PSI-6130 debe ser fosforilada na forma 5'-trifosfato.Investigáronse a fosforilación de PSI-6130 e a inhibición do VHC NS5B.A fosforilación de PSI-6130 mediante a 2'-desoxicitidina quinase humana recombinante (dCK) e a uridina-citidina quinase 1 (UCK-1) foi medida mediante unha reacción espectrofotométrica acoplada.PSI-6130 demostrou ser un substrato para dCK purificado, cun Km de 81 microM e un kcat de 0,007 s-1, pero non era un substrato para UCK-1.O monofosfato PSI-6130 (PSI-6130-MP) foi fosforilado eficientemente ao difosfato e, posteriormente, ao trifosfato mediante UMP-CMP quinase humana recombinante e nucleósido difosfato quinase, respectivamente.Estudou a inhibición das ARN polimerases NS5B do VHC de tipo salvaxe e mutadas (S282T).A constante de inhibición en estado estacionario (Ki) para o PSI-61 30 trifosfato (PSI-6130-TP) co encima de tipo salvaxe foi de 4,3 microM.Resultados similares obtivéronse co trifosfato de 2'-C-metiladenosina (Ki=1,5 microM) e o trifosfato de 2'-C-metilcitidina (Ki=1,6 microM).NS5B coa mutación S282T, que se sabe que confire resistencia á 2'-C-metiladenosina, foi inhibida por PSI-6130-TP tan eficientemente como o tipo salvaxe.A incorporación de PSI-6130-MP no ARN catalizado pola ARN polimerase NS5B purificada deu lugar á terminación da cadea.