Produtos

Máis do 70% dos gliomas de baixo grao levan unha mutación heterocigota R132H no xene que codifica a isocitrato deshidroxenase 1 (IDH1).Isto confire á enzima a nova capacidade de converter o α-cetoglutarato en 2-hidroxiglutarato, levando finalmente á tumorigénesis.A principal fonte de produción de 2-hidroxiglutarato é a glutamina, que, no cancro, tamén é unha fonte de anaplerose do ciclo do ácido tricarboxílico (TCA).Unha fonte alternativa de anaplerose é o fluxo de piruvato a través da piruvato carboxilase (PC), que é unha vía común nos astrocitos normais.O obxectivo deste estudo foi determinar se a PC serve como fonte de anaplerose por TCA en células mutantes IDH1 nas que a glutamina se usa para a produción de 2-hidroxiglutarato.O fluxo de piruvato a través de PC e a través da piruvato deshidroxenase (PDH) determinouse mediante espectroscopia de resonancia magnética para probar o etiquetado de glutamato e glutamina derivados da glicosa [2-¹³C], derivados da ¹³C.Utilizáronse ensaios de actividade, RT-PCR e western blot para probar a expresión e actividade dos encimas relevantes.Os datos do Cancer Genome Atlas (TCGA) foron analizados para avaliar a expresión de encimas en mostras de glioma humano. En comparación coas células de tipo salvaxe, as células IDH1 mutantes aumentaron significativamente o fluxo fraccionado a través do PC.Isto asociouse cun aumento significativo da actividade e expresión do PC.Ao mesmo tempo, a actividade da PDH diminuíu significativamente, probablemente mediada por un aumento significativo da fosforilación inhibitoria da PDH pola PDH quinase 3. En consonancia coa observación nas células, a análise dos datos de TCGA indicou un aumento significativo da expresión de PC en mostras de glioma humano que expresan IDH mutantes en comparación coas especies silvestres. tipo IDH.Os nosos descubrimentos suxiren que os cambios na PC e na PDH poden ser unha parte importante da adaptación celular á mutación IDH1 e poden servir como dianas terapéuticas potenciais.