Produtos

O presente estudo describe un método sinxelo e eficiente que utiliza a cromatografía líquida de alto rendemento (HPLC) acoplada á detección de fluorescencia para a determinación dos parámetros cinéticos da captación de glutamato no tecido nervioso.O tecido retiniano obtido de pitos de 7 días foi incubado con concentracións coñecidas de glutamato (50-2000 μM) durante 10 min, e medíronse os niveis do neurotransmisor derivado de o-ftaldehído (OPA) no medio de incubación.Ao valorar a diferenza entre as concentracións iniciais e finais de glutamato no medio, caracterizouse un mecanismo de captación saturable (K(m)=8,2 e V(max)=9,8 nmol/mg proteína/min).Esta medida foi en gran parte dependente do sodio e da temperatura, o que apoia firmemente que o mecanismo para os decrementos da concentración é efectivamente absorbido por transportadores de alta afinidade.Engadido a isto, os nosos resultados tamén demostraron que o cloruro de cinc (un inhibidor dos transportadores de glutamato/aspartato) provocou unha diminución dependente da concentración na absorción de glutama te, demostrando a especificidade da nosa metodoloxía.En xeral, o presente traballo caracteriza unha metodoloxía alternativa para avaliar a captación de glutamato no tecido nervioso mediante HPLC.Este enfoque podería ser unha ferramenta importante para os estudos asociados á caracterización de alteracións diminutas no transporte de glutamato relacionadas coa lesión do sistema nervioso central.