Produtos

LecA (PA-IL) é unha lectina e adhesina citotóxicas producidas por Pseudomonas aeruginosa que se une a galactosidos hidrófobos con alta especificidade e afinidade.Usando unha fusión de tradución lecA-egfp e análise de inmunotransferencia da matriz extracelular do biofilm, mostramos que lecA se expresa en células cultivadas con biofilm.Nos ensaios de biopelículas estáticas tanto en poliestireno como en aceiro inoxidable, a profundidade e a cobertura da superficie do biofilm foron reducidas pola mutación de lecA e melloráronse na cepa PAO-P47 que produce sobreprodución de LecA.A cobertura da superficie do biofilm pola cepa nai, PAO-P47, pero non o mutante lecA en cupóns de aceiro, tamén foi inhibida polo crecemento en presenza de isopropil-beta-D-tiogalactósido (IPTG) ou p-nitrofenil-alfa-D-galactosido. NPG).Ademais, as biopelículas maduras de tipo salvaxe formadas en ausencia destes galactosidos hidrófobos poderían dispersarse coa adición de IPTG.Pola contra, a adición de p-nitrofenil-alfa-L-fucosa (NPF) que ten unha alta afinidade pola lecti n de P. aeruginosa LecB (PA-IIL) non tivo ningún efecto na formación ou dispersión de biofilm.O crecemento planctónico de P. aeruginosa PAO1 non se viu afectado pola presenza de IPTG, NPG ou NPF, nin a cepa foi capaz de utilizar estes azucres como fontes de carbono, o que suxire que os efectos observados na formación de biopelículas foron debido á inhibición competitiva do ligando LecA. encadernación.Tamén se obtiveron resultados similares para biopelículas cultivadas en condicións de fluxo dinámico en cupóns de aceiro, o que suxire que LecA contribúe á arquitectura do biofilm de P. aeruginosa en diferentes condicións ambientais.

Nas follas de plantas Arabidopsis detectouse unha alfa-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) capaz de liberar o residuo de t-fucosilo da cadea lateral dos oligosacáridos de xiloglucano.Ademais, purificouse unha alfa-L-fucosidase cunha especificidade de substrato similar a partir de follas de repolo (Brassica oleracea) para formar unha única banda en SDS-PAGE.Desta banda de proteínas obtivéronse dúas secuencias peptídicas, e utilizáronse para identificar un xene de Arabidopsis que codifica unha alfa-fucosidase que propoñemos chamar AtFXG1.Ademais, tamén se atopou un xene de Arabidopsis con homoloxía con alfa-L-fucosidases coñecidas, e propuxemos nomeala AtFUC1.Tanto AtFXG1 como ATFUC1 expresáronse de forma heteróloga en células de Pichia pastoris e as actividades alfa-L-fucosidase segregaron ao medio de cultivo.A alfa-L-fucosidase codificada por AtFXG1 era activa contra os oligosacáridos do xiloglucano XXFG así como contra o 2'-fucosil-lactitol pero non contra o p-nitrofenil-alfa-L-fucopiranósido.Non obstante, o AtFUC1 expresado de forma heteróloga só era activo contra o 2'-fucosil-lactitol.Así, o primeiro debe estar relacionado co metabolismo do xiloglucano.