Produtos

1.Os métodos de elaboración de perfiles de metabolitos son ferramentas importantes para a medición de conxuntos de metabolitos en sistemas biolóxicos.Aínda que a maioría dos métodos de elaboración de perfiles de metabolitos informan de intensidades relativas ou dependen duns poucos estándares internos que representan todos os metabolitos, o último requisito para unha descrición cuantitativa do conxunto de metabolitos en células biolóxicas e fluídos é a determinación da concentración absoluta.Informamos aquí dun método de perfilado de metabolitos dirixidos por cromatografía de gases/espectrometría de masas en tándem (GC/MS/MS) de alto rendemento e sensible que permite a cuantificación absoluta de todos os metabolitos detectados.O método baséase na derivatización e cuantificación do cloroformiato de metilo mediante a aplicación de mostras con patróns de metabolitos derivatizados por separado con reactivos de derivatización deuterado.A tradicional ionización por impacto de electróns substitúese pola ionización química positiva xa que esta última preserva en maior medida o ión molecular e outros fragmentos de alto peso molecular.Isto fixo máis fácil seleccionar transicións MS/MS únicas entre os moitos metabolitos coeluyentes.Actualmente, o novo método GC/MS/MS comprende 67 metabolitos primarios comúns, dos cales a maioría pertencen aos grupos de ácidos orgánicos amino e non amino.Amosamos a aplicabilidade do método en mostras de orina e soro.O método é unha mellora significativa da metodoloxía actual para o perfil cuantitativo de metabolitos GC/MS de aminoácidos e ácidos orgánicos non amino.

O 2,24S-hidroxicolesterol (24OHC) e o 27-hidroxicolesterol (27OHC) son dous oxisterois estruturalmente similares de diferentes orixes: o primeiro fórmase case exclusivamente no cerebro e o segundo fórmase en menor medida no cerebro que na maioría dos outros órganos.HIPÓTESE A PROBAR: o dano neuronal e/ou a desmielinización provoca un aumento do fluxo de 24OHC do cerebro ao líquido cefalorraquídeo (LCR), mentres que un defecto da barreira hematoencefálica provoca un aumento do fluxo de 27OHC desde a circulación ao LCR. Dilución de isótopos-masa utilizouse a espectrometría para ensaiar os dous oxiesteroles en LCR e plasma de máis de 250 pacientes con diferentes enfermidades neurolóxicas e xeriátricas. Os niveis de LCR dos dous oxisterois foron moito máis afectados polas diferentes enfermidades que os niveis plasmáticos.Os pacientes con enfermidades desmielinizantes activas tiñan niveis aumentados de 24OHC no LCR cunha relación 24OHC/27OHC relativamente alta.Os pacientes con meninxite en xeral tiñan altos niveis de ambos esteroides cunha relación 24OHC/27OHC baixa.Os pacientes con enfermidade de Alzheimer aumentaron lixeiramente os niveis de 24OHC no LCR con menos aumento de 27OHC.Os pacientes con esclerose múltiple tiñan unha tendencia a ter niveis máis altos de 24OHC durante os períodos activos cunha alta proporción 24OHC/27OHC. As medicións dos dous oxiesterois no LCR e no plasma poden aumentar significativamente os métodos bioquímicos existentes para a avaliación de enfermidades neurolóxicas.