Produtos

CTP:fosfocolina citidiltransferase α (CCTα) é un encima nuclear que cataliza o paso limitante da velocidade da vía CDP-colina para a síntese da fosfatidilcolina (PC).A activación lipídica de CCTα produce a súa translocación á envoltura nuclear e a expansión dunha rede de membrana intranuclear denominada retículo nucleoplásmico (NR) por un mecanismo que implica a deformación da membrana.As láminas nucleares tamén son necesarias para a estabilidade e proliferación do NR, pero non se sabe se esta estrutura única, ou a lámina nuclear en xeral, é necesaria para a síntese de PC.Para examinar esta relación, a lámina nuclear foi esgotada polo ARNi ou interrompida pola expresión da lámina A mutante da síndrome de proxeria de Hutchinson-Gilford (HGPS) (proxerina) e analizouse o efecto sobre o metabolismo da CCTα e da colina.O silenciamento mediado por ARNsi da lamina A/C ou da lamina B1 nas células CHO para diminuír o NR non tivo ningún efecto sobre a síntese de PC, mentres que o dobre knockdown inhibiu de forma non específica a vía.Confirmando o seu papel menor na síntese de PC, só se detectou no NR o 10% da colina/etanolamina fosfotransferase sobreexpresada transitoriamente.Nas células CHO, o CCTα era nucleoplásmico e co-localizado con GFP-proxerina en pregamentos nucleares e invaxinacións;con todo, os fibroblastos de HGPS mostraron unha distribución anormal de CCTα no citoplasma e a envoltura nuclear que estaba acompañada dunha redución dobre na síntese de PC.A pesar da súa localización alterada, os experimentos de marcaxe de colina mostraron que a actividade CCT non se viu afectada e que a inhibición da síntese de PC foi rastrexada na actividade reducida dun transportador de colina sensible ao hemicolinio.Concluímos que CCTα e as laminas cooperan especificamente para formar o NR, pero a estrutura global da envoltura nuclear ten un impacto mínimo na actividade CCT e na síntese de PC.