Produtos

Efectos dos deterxentes na actividade da atpase da glicoproteína P: diferenzas nas perturbacións das actividades basais e dependentes de verapamilo.

A glicoproteína P (P-gp), unha glicoproteína de membrana plasmática asociada ao fenotipo de resistencia a múltiples fármacos, é responsable do efluxo dependente do ATP de varios fármacos anfifílicos.Usando vesículas de membrana preparadas a partir da liña celular resistente a múltiples fármacos DC-3F/ADX, estudamos a perturbación das actividades da P-gp ATPasa basal (é dicir, en ausencia de fármaco) e dependentes de verapamilo inducidas por varios deterxentes, en estado non solubilizante, así como nas concentracións solubilizantes.A solubilización progresiva da membrana co aumento da concentración de deterxente monitorizouse mediante experimentos de dispersión da luz e centrifugación.Para as concentracións de deterxentes non solubilizantes, todos os deterxentes probados, excepto o DOC, inducían unha inhibición parcial da actividade da P-gp ATPasa, que non estaba correlacionada coa cantidade de varios deterxentes probados incorporados nas membranas.A análise da activación da P-gp inducida polo verapamilo revela que a actividade da ATPasa da P-gp está modulada de forma diferente polos distintos deterxentes a concentracións non solubilizantes.Así, é máis probable que se produzan interaccións específicas entre P-gp e deterxentes en lugar dunha perturbación global da membrana.Despois da solubilización polos distintos deterxentes probados, a actividade basal da P-gp ATPasa foi practicamente inhibida por completo, excepto na presenza de CHAPS que foi capaz de preservar esta actividade a un nivel comparable ao medido nas membranas nativas.Non obstante, a activación da P-gp ATPasa inducida polo verapamilo perdeuse durante a solubilización da P-gp por CHAPS, pero recuperouse despois da dilución de CHAPS por debaixo da súa concentración micelar crítica.Estas observacións indican interaccións específicas entre moléculas P-gp e CHAPS dentro das micelas mixtas.En xeral, os nosos datos que evidencian interaccións específicas P-gp/deterxentes son consistentes coa localización dos sitios de transporte de fármacos nos dominios transmembrana P-gp.